Антинуклеарна антитела (АНА)

Антинуклеарна антитела су део сложеног дијагностичког процеса системских болести везивног ткива. Сложени механизам стварања антинуклеарних антитела отежава тумачење њихових резултата, а присуство или одсуство одређеног антитела не указује увек на процес болести. Које су врсте антинуклеарних антитела? Када треба извршити тест?

Преглед садржаја:

1. Антинуклеарна антитела - врсте
2. Антинуклеарна антитела - формирање и механизам деловања
3. Антинуклеарна антитела - индикације за студију
4. Антинуклеарна антитела - шта је тест?
5. Антинуклеарна антитела - како протумачити резултат?

Антинуклеарна антитела (АНА) су аутоантитела усмерена против елемената ћелијског језгра, нпр. ДНК и цитоплазме. Они су једно од најразличитијих и најпроученијих антитела.

Антинуклеарна антитела - врсте

• антитела против нуклеарних антигена који се могу извући (анти-ЕНА):
• против ДНК топоизомеразе И (анти-Сцл70)
• против рибонуклеопротеина (анти-РНП)
• против Смитх антигена (анти-См)
• анти-Ми2 / Ми-2
• анти-Ро (СС-А)
• анти-Ла
• анти-Јо1
• анти-ПМ-Сцл
• анти-кн
• антитела против нуклеарног протеина који ствара поре гп-2010 (анти-гп-210)
• антитела против нативне дволанчане ДНК (анти-дсДНА)
• антцентромерна антитела (анти-АЦА)

Антинуклеарна антитела - формирање и механизам деловања

Аутоимуност је абнормалан одговор имуног система на сопствена ткива, што резултира појавом аутоимуних болести.

Описани су различити механизми аутоимуности, од којих је један ослобађање антигена скривених од имунолошког система, нпр. Као резултат запаљенског оштећења ткива.

Тада се ослобађају елементи који се налазе у ћелијском језгру, нпр. ДНК, РНК, хистони, које имуни систем почиње да препознаје као нешто страно и ствара антинуклеарна антитела против њих.

Антинуклеарна антитела - индикације за студију

• сумња на болести везивног ткива:
• системски еритематозни лупус (присуство антитела код 95-100% пацијената; антитела на дсДНА су специфични маркер болести)
• лупус изазван лековима (95-100% пацијената)
• антифосфолипидни синдром (40-50% пацијената)
• системска склеродермија (80-95% пацијената, посебно антитела на Сцл70)
• полимиозитис и дерматомиозитис (40-80% пацијената, посебно антитела против Јо1 и анти-Ми2)
• Сјогренов синдром (48-96% пацијената, нарочито анти-Ро и анти-Ла антитела)
• реуматоидни артритис (око 10% пацијената)
• јувенилни идиопатски артритис (мање од 10% пацијената)
• Раинаудов синдром (20-60% пацијената)
• фибромиалгија (15-25% пацијената)
• мешане болести везивног ткива (95-100% пацијената)
• процена активности болести и праћење ефикасности лечења, нпр. антитела на дсДНА у системском еритематозном лупусу
• корелирање присуства антитела са појавом специфичних симптома болести, нпр. Сјогренов синдром и присуство анти-Ро и анти-Ла антитела
• предвиђање болести у будућности

Антинуклеарна антитела - шта је тест?

За одређивање антинуклеарних антитела, крв узета из флексије лакта се пости.

Методе које се користе за одређивање антитела се веома разликују и зависе од врсте антинуклеарних антитела која се мере. То су углавном имунолошке методе као што су:

• ЕЛИСА
• РИА
• индиректна имунофлуоресценција
• метода двоструке имунодифузије
• вестерн блот

У случају антинуклеарних антитела, користи се двостепена дијагноза. Прво се врши скрининг тест применом индиректне имунофлуоресцентне методе, коју карактерише велика осетљивост.

Индиректна метода имунофлуоресценције састоји се у имобилизацији ћелија ХЕп-2 изведених из хуманих епителних ћелија на стакалцу микроскопа.

Ћелије ове линије у својој цитоплазми и ћелијском језгру имају антигене који везују патолошка антитела из крви пацијента.

Након додавања серума пацијента у стакло, антинуклеарна антитела се везују за специфичне антигене и видљива су под микроскопом захваљујући специјалним флуоресцентним маркерима.

Предност индиректне имунофлуоресценције је могућност разликовања врста антитела на основу врсте осветљености флуоресцентне боје.

На пример, сјај језгра хомогеног типа указује на присуство антитела на дсДНК или анти-ссДНК.

Позитиван резултат скрининг теста мора увек бити потврђен. У ту сврху користе се врло специфичне имунолошке методе, нпр. Вестерн блот. Након откривања присуства и идентификације врсте антинуклеарних антитела, одређује се његов титар, тј. Највише разблажење серума при којем се може утврдити присуство антитела.

Антинуклеарна антитела - како протумачити резултат?

Исправан титар антинуклеарних антитела треба да буде испод 1:40.

Ако је скрининг тест за антинуклеарна антитела негативан и нема клиничких симптома који указују на системско обољење везивног ткива, дијагноза се не би требало проширити тако да обухвати специфична антитела, нпр. Анти-дсДНА, анти-См.

Клинички релевантним титрима код одраслих сматра се ≥ 1: 160, а код деце ≥ 1:40.

У случају позитивних резултата, предложено је тумачење резултата теста на следећи начин:

• титар 1: 40-1: 80 - гранични резултат (слабо позитиван), у одсуству клиничких симптома болести везивног ткива, не препоручује се понављање теста или извођење накнадног теста, јер се резултати код већине људи током година не мењају
• титар 1: 160-1: 640 - средње позитиван резултат, у одсуству клиничких симптома болести везивног ткива, препоручује се поновити тест након 6 месеци
• титар ≥ 1: 1280 - висок позитиван резултат, у присуству клиничких симптома болести везивног ткива потребна је даља специјалистичка дијагноза за дијагнозу болести

Треба имати на уму да је серолошко испитивање антинуклеарних антитела део сложеног дијагностичког процеса и позитиван резултат се увек мора тумачити у контексту клиничке слике и присуства карактеристичних симптома болести.

Антинуклеарна антитела са ниским титром налазе се у 5% здраве популације и њихова учесталост расте са годинама.

Поред тога, њихово присуство се налази у физиолошким и патофизиолошким условима у којима антинуклеарна антитела немају дијагностички значај:

• инфекције, нпр. туберкулоза, сифилис, маларија
• болести јетре, нпр. цироза јетре
• плућне болести, нпр. саркоидоза, азбестоза
• карциноми, нпр. леукемија, лимфом, рак дојке, меланом
• кожне болести, нпр. псоријаза, лишај планус
• након трансплантације органа, нпр. трансплантације срца, трансплантације бубрега
• употреба лекова, нпр. антиепилептика, хидралазина, литијумових соли,
• друге аутоимуне болести, нпр. Хасхимото-ова болест, Аддисон-ова болест, дијабетес типа И
• трудноћа (до 20% трудница)

Вреди знати ...

Етничке варијације карактеришу појаву различитих врста антинуклеарних антитела.

На пример, кавкаски пацијенти са системском склерозом имају већу вероватноћу да имају анти-АЦА антитела, а Афроамериканци и Африканци вероватније да имају антитела која реагују на топоизомеразу.

Препоручени чланак:

Дијагностички тест АНА (антинуклеарна антитела)

Књижевност

1. Фисцхер К. ет ал.Аутоантитела у реуматолошкој пракси. Форум Реуматол. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Интерне болести, приредио Сзцзеклик А., Медицина Практицзна Краков 2010
3. Лабораторијска дијагностика са елементима клиничке биохемије. Приручник за студенте медицине уредници Дембинска-Киећ А. и Наскалски Ј.В., Елсевиер Урбан & Партнер Видавництво Вроцłав 2009, 3. издање

О аутору

Каролина Карабин, др мед., Молекуларни биолог, лабораторијски дијагностичар, Цамбридге Диагностицс Полска, биолог са специјализацијом из микробиологије и лабораторијски дијагностичар са преко 10 година искуства у лабораторијском раду. Дипломирао на Факултету за молекуларну медицину и члан Пољског друштва за хуману генетику, шеф истраживачких грантова у Лабораторији за молекуларну дијагностику на Одељењу за хематологију, онкологију и унутрашње болести Медицинског универзитета у Варшави. Одбранила је титулу доктора медицинских наука из области медицинске биологије на 1. медицинском факултету Медицинског универзитета у Варшави. Аутор многих научних и научно-популарних радова из области лабораторијске дијагностике, молекуларне биологије и исхране. Свакодневно, као специјалиста у пољу лабораторијске дијагностике, води основно одељење Цамбридге Диагностицс Полска и сарађује са тимом нутрициониста на ЦД-у за дијете. Своје практично знање о дијагностици и дијетотерапији болести дели са специјалистима на конференцијама, тренинзима, у часописима и на веб локацијама. Посебно је занима утицај модерног начина живота на молекуларне процесе у телу.

Прочитајте још чланака овог аутора