Проточна цитометрија је дијагностичка и истраживачка техника позната већ дуги низ година и широко коришћена у онкологији. Проточна цитометрија омогућава испитивање ћелија које чине суспензију у ламинарном или слојевитом течном току помоћу уређаја названог проточни цитометар. Које су индикације за проточну цитометрију и како се то ради?
Проточна цитометрија се користи у дијагнози хематолошких неоплазми јер су течни тумори, али то је само помоћна метода. Међутим, вреди запамтити да постоји један рак који се може дијагностиковати само овом методом. Ово је хронична лимфоцитна леукемија.
Код других неопластичних болести проточна цитометрија се користи као дијагностичко помагало, јер показује врло важне особине неопластичних ћелија. Ова метода се такође користи за процену ефикасности примењеног третмана.
Проточна цитометрија - шта она показује?
Струја течности која садржи испитне честице пропушта се константном брзином (100-2000 честица у секунди) кроз мерно подручје цитометра. Овде оптичке методе анализирају облике, димензије, унутрашњу структуру ћелија и њихов садржај, нпр. ДНК. Све ћелије су оптички означене.
Мерења се заснивају на својствима расејања ласерске светлости од стране појединих ћелија или њихових компоненти (језгра, хромозоми, митохондрији) или флуоресценције коју оне индукују.
Оптички сигнали се претварају у електричне сигнале који се након анализе графички приказују као моно- или бипараметријска расподела.
Цитометар такође омогућава сегрегацију честица након изласка из зоне мерења. Може се рећи да апарат распоређује (одваја) ћелије са истим саставним елементима (препаративно сортирање) или изолује одређене врсте ћелија (аналитичко сортирање).
Проточна цитометрија омогућава проучавање популационих карактеристика ћелија, анализу ћелијских компонената (нарочито попут нуклеинских киселина, протеина, површинских и ћелијских антигена), ензимске активности, мембранског потенцијала, активности митохондрија, унутарћелијског пХ, транспорта јона и флуидности мембране.
Проточна цитометрија - примена
Проточна цитометрија која се користи у дијагностици омогућава одређивање фенотипа неопластичних ћелија и експресије појединих протеина. Да би се то постигло, користе се обележена флуоресцентна антитела која се на карактеристичан начин везују за антигене на површини ћелијске мембране. Захваљујући томе могуће је утврдити степен њихове диференцијације, порекло, прогностичке и терапијске маркере, који олакшавају одлуку о даљим дијагностичким и терапијским поступцима.
Друга апликација за проточну цитометрију је праћење ефикасности примењеног третмана проценом тзв „резидуална болест“, што је проценат ћелија са фенотиповима сличним туморима који остају након лечења.
Проточна цитометрија такође олакшава истраживање болести карцинома. Захваљујући овој методи могуће је тражити нпр. Рецепторе који се налазе на површини неопластичних ћелија и могу постати циљеви лечења.
Метода омогућава процену активности протеина унутар ћелије. Такође је могуће проценити ћелијски циклус, нпр. Одређивањем количине ДНК у ћелији.
У процесу пролиферације, ћелија пролази кроз ћелијски циклус кроз фазе у којима удвостручује количину ДНК. Проценом ове количине могуће је назначити у којој су фази ћелије, да ли се размножавају или не или улазе у апоптозу. Другим речима, помоћу проточне цитометрије можете сазнати да ли се ћелије припремају за апоптозу, програмирани процес смрти.
Проточна цитометрија - будућност
Проточна цитометрија је позната и користи се у медицини већ неколико деценија. Међутим, стално се побољшава и ствара нове дијагностичке и истраживачке могућности. У првом периоду употребе ове методе било је могуће утврдити само величину и степен грануларности ћелија.
Употреба ласерске светлости у уређајима проточне цитометрије омогућава вам побуђивање одређених флуоресцентних маркера, а затим процену њихове емисије. Савремени цитометри омогућавају значајан пораст броја маркера који се истовремено процењују, што дефинитивно прелази у повећање осетљивости ове методе.
Због тога се користи не само у дијагнози неопластичних болести, већ и за процену ефикасности лечења.
О аутору
Прочитајте још чланака овог аутора
